Главная Семестры Проекты Обо мне

Классификация ферментов EC

1.Сбор информации о своем ферменте

DLDH_HUMAN-фермент который будет исследоваться в этой работе.
Соберем все базовые данные о ферменте через запись в банке SwissProt/UniProt.

     Full=Dihydrolipoyl dehydrogenase, mitochondrial

Перевод=Митохондриальная дегидрогеназа дигидролипоамида
EC=1.8.1.4
1.---оксиредуктазы
1.8- маленький подкласс, реагирующий с неорганическими и органическими тиолами.
1.8.1 - с НАДФ(+) и НАД(+) в качестве акцепторных ионов.
IntEnz
Функция: Принимает участие в процессах расщепления, как глицина, так и альфа-кетокислотных-дегидрогеназных сложных соединений.
Реакция: Protein N(6)-(dihydrolipoyl)lysine + NAD(+) <=> protein N(6)-(lipoyl)lysine + NADH
2.Сколько ферментов человека с близкими функциями описано в Swiss-Prot?

Запрос 1.8.1.4 1.8.1 1.8 1.
Общее количество 73 547 1536 37924
Совпадений у человека 1 7 26 571

3.Насколько сохраняется функция фермента у белков со сходными последовательностями?

Запрос 1.8.1.4 1.8.1 1.8 1.
Совпадений с Mus Musculus 1 7 25 549

После заполнения этой таблицы мы проводим самый последний поиск с сохранением результатов в виде двух файлов:
1)fasta-файл
2)Текстовая таблица
formatdb -i EC.fasta -p T -n base
blastall -p blastp -d base -i EC.fasta -e 1 -o blastp.out
sp|P24815|3BHS1_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta ...   736   0.0  
sp|O35469|3BHS6_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta ...   626   0.0  
sp|P26149|3BHS2_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta ...   619   0.0  
sp|P26150|3BHS3_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta ...   615   0.0  
sp|Q61767|3BHS4_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 4;     552   0.0  
sp|Q61694|3BHS5_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 5;     538   0.0  
sp|Q9EQC1|3BHS7_MOUSE 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7;     231   2e-73
sp|Q9D665|D42E1_MOUSE Short-chain dehydrogenase/reductase family...   108   4e-28
sp|Q9R1J0|NSDHL_MOUSE Sterol-4-alpha-carboxylate 3-dehydrogenase...   101   8e-26
sp|Q8K3F7|TDH_MOUSE L-threonine 3-dehydrogenase, mitochondrial;        33   0.005
sp|Q7TNT2|FACR2_MOUSE Fatty acyl-CoA reductase 2;                      30   0.064
Полный итоговый файл:blastp.out

ID EC Уровень совпадения
3BHS1_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS6_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS2_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS3_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS4_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS5_MOUSE 1.1.1.145 класс
3BHS7_MOUSE 1.1.1.145 класс
D42E1_MOUSE 1.1.1 класс
NSDHL_MOUSE 1.1.1.170 класс
TDH_MOUSE 1.1.1.103 класс
FACR2_MOUSE 1.2.1 класс


Почти полное отсутствие совпадений по EC кодам было ожидаемо так как в таблице в начале этого задания было указано чрезвычайно низкое количество совпадений даже для первой цифры EC кода. Что удивительно, при этом мы можем наблюдать достаточно неплохие веса выравниваний для выбранных програмой blastp последовательностей. В результате, мы можем считать настоящими гомологами все последовательности, кроме последних двух.
©Melnichuk Anastasia