Четвертый семестр
Главный сайт
|
Задание 1.1. Поиск мотива программой MEME
Выдача MEME
Задача заключалась в поиске сайта связывания транскрипционного фактора MecI в геноме золотистого стафилококка
(Staphylococcus aureus subsp. aureus N315) - бактерии, живущей на коже человека и вызывающей широкий спектр кожных
заболеваний. Результаты работы программы MEME (запрашивалось 0-3 последовательности):
Лого:
PWM:
E-value: 2.0e-011
Паттерн: ATAYTACAAATGTAGTMT
Задание 1.2. Поиск похожих мотивов программой ТОМТОМ
Поиск осуществлялся в базе данных RegTransBase.
Название найденного ТФ: Nucleotide reductase regulation protein (регулятор нуклеотидредуктазы) NrdR
Видно, что E-value большое и мотивы заметно различаются. Многие позиции полностью различны, длина также различается на 2 нуклеотида.
Задание 1.3. Поиск мотива в геноме программой FIMO
Был проведен поиск в геноме бактерии данного мотива программой FIMO (по upstrean regions - именно там обычно связываются транскрпционные
факторы). P-value было ограничено 1e-04, было получено 187 находок.
Список находок
Лучшие находки:
Две лучшие находки - гены mecR1 и mecA.
К сожалению база данных STRING никак не связывает их. Зато в родственном виде Staphylococcus epidermidis RP62A ген mecR1 связан с геном
нашего транскрипционного фактора mecI (на рисунке). Они находятся рядом друг с другом в геноме.
Функции генов:
mecR1 - регулятор резистентности к метицилину
mecA - адаптор, распознает неправильно свернутые белки и направляет ClpC-протеазу на них
Задание 2.1. Сравнение с сайтами метилирования
Координаты генов:
MecR1 47137..48894
MecA 45031..47037 (complement)
Для поиска использовались участки связывания ТФ и окружающие их 20 нуклеотидов с каждой стороны (так мотивы расположены на расстоянии 3 нуклеотида
друг от друга, но на разных цепях, было взято их объединение их окружения).
Результаты поиска:
Список находок
Список находок длиной 3 и более:
Start End Strand Pattern Mismatch Sequence
8 10 + pattern824:VCW . CCT
11 13 + pattern824:VCW . CCT
22 24 + pattern824:VCW . ACT
25 27 + pattern824:VCW . ACA
41 43 + pattern824:VCW . ACA
7 11 + pattern838:YSCNS . TCCTC
12 15 + pattern351:CNNR . CTTA
42 45 + pattern351:CNNR . CAAA
60 63 + pattern351:CNNR . CAAA
23 34 + pattern379:CTANNNNNNTAG . CTACATTTGTAG
31 42 + pattern688:GTANNNNNNTAC . GTAGTATATTAC
50 60 + pattern692:GTAYNNNNGTC . GTATTTATGTC
21 23 + pattern745:SAY . GAC
26 28 + pattern745:SAY . CAT
8 11 + pattern263:CCDS . CCTC
8 11 + pattern285:CCTC . CCTC
Видно, что многие находки соответствуют очень слабым (неспецифичным) паттернам. Лучшие паттерны - 379, 688 и 692,
в них 6 точных букв.
Многие находки попадают на сайты связывания (участок 21-52).
Задание 2.2. Поиск метилтрансфераз в REBASE
Штамм 1
Штамм 2
Штамм 3
В геномах трех штаммов золотистого стафилококка было найдено в общей сумме 120 метилтрансфераз, но точные сайты
для работающих с ДНК метилтрансфераз указаны не были. Видимо это не так легко предсказать.
==============================================================================================================================================
|