Таксономия выбранных бактерий
Bacillus subtilis | BACSU | Firmicutes, Bacilli; Bacillales; Bacillaceae; Bacillus; Bacillus subtilis group |
Clostridium tetani | CLOTE | Firmicutes, Clostridia; Clostridiales; Clostridiaceae; Clostridium |
Enterococcus faecalis | ENTFA | Firmicutes, Bacilli; Lactobacillales; Enterococcaceae; Enterococcus |
Finegoldia magna | FINM2 | Firmicutes, Clostridia; Clostridiales; Clostridiales incertae sedis; Clostridiales Family XI. Incertae Sedis; Finegoldia |
Lactococcus lactis | LACLM | Firmicutes, Bacilli; Lactobacillales; Streptococcaceae; Lactococcus |
Staphylococcus epidermidis | STAES | Firmicutes, Bacilli; Bacillales; Staphylococcaceae; Staphylococcus |
Streptococcus pyogenes | STRP1 | Firmicutes, Bacilli; Lactobacillales; Streptococcaceae; Streptococcus |
Рис.1.Филогенетическое дерево отобранных бактерий.
Реконсрукция дерева белков
Для работы выбрано семейство факторов инициации трансляции 2 (IF2). С помощью команды seqret были скачены последовательности всех IF2 выбранных бактерий. Затем с помощью JalView и программы muscle эти последовательности были выровнены, окрашены по проценту идентичности и представлены в блочной форме с шириной блока 100 нуклеотидов(Рис.2).
Рис.1.Привильное филогенетическое дерево отобранных бактерий.
Рис.2. Выравнивание факторов инициации трансляции 2 выбранных бактерий с окраской по проценту идентичности.
Затем 4 различными способами в JalView были построены филогенетические деревья последовательностей (Рис.3-6).
Рис.3. Дерево, созданное с помощью алгоритма Average Distance Using % Identity. Ветви 2,3,5 есть в правильном дереве - это 1,2,4 соответственно.
Рис.4.Дерево, созданное с помощью алгоритма Neighbour Joining Using % Identity Ветвь 4 есть на правильном дереве - это 1 ветвь.
Рис.5. Дерево, созданное с помощью алгоритма Average Distance Using BLOSUM62 Ветвь 2, 5 есть на правильном дереве - это 5, 4 соответственно.
Рис.6. Дерево, созданное с помощью алгоритма Neighbour Joining Using BLOSUM62 Ветвь 2,3,4 есть на правильном дереве - это 2, 3, 5 соответственно.
Далее с помощью MEGA, используя алгоритм Maximum Parsimony, было построено ещё одно дерево этих последовательностей. Верное укоренение позволило составить дерево идентичное правильному (Рис.7).
Рис.7. MEGA дерево последовательностей IF2 отобранных бактерий.