Практикум 10

Консервативный мотив в выравнивании последовательностей гомологичных белков

Выбрала домен PF17726, семейства Dam-replacing HTH domain,
Скачала выравление seed=12
После открыла выравнивание в Jalview, использовала remove redundancy 100-90-80% все остались(послежовательностей вообщем-то немного) , покрасила Clustal, при пороге идентичности 100% был найден большой консервативный мотив: .KI[RS]QQLQ.[LA]RD. Провела поиск по этому паттерну во всем выравнивании в выравнивании он соответствует ->12 последовательностям.

фото
img 1. Выравнивание последовательностей домена DpnI_C
(В формате ProSite этот паттерн выглядит так:x-K-I-[RS]-Q-Q-L-Q-x-[LA]-R-D-x)
С помощью онлайн-сервиса MyHints производился поиск мотивов по базе данных SwissProt. В результате нашлось 2 паттерна
>sw:T2D1_STRR6/228-240 source=pattern
EKIRQQLQILRDK
>sw:T2D1_STRPN/228-240 source=pattern
EKIRQQLQILRDK

Мотив, специфичный для одной клады филогенетического дерева

Далее было построено в Jalview филогенетическое дерево алгоритмом NJ(Neighbour Joining), выбирая матрицу BLOSUM62

фото
img 4.Филогенетическое дерево алгоритмом Neighbour Joining

фото
img 5. Для работы был выбран новый мотив: [IAL]KHP[EV]N[NT]F[VI] (выделен)

фото
img 6. Мотив встретился только в выбраной кладе

PSI-BLAST

Выбрала P47908, Фактор способствующий гибернации рибосом. Белок HPF (фактор способствующий гибернации рибосом) играет важную роль в регулировании активности рибосом в условиях стресса или пониженных метаболических потребностей клетки. Во время недостатка питательных веществ или других стрессовых условий HPF способствует временной инактивации рибосом, что ведет к минимизации белкового синтеза и сохранению энергии клетки.
Номер итерации Число находок выше порога (0,005) Идентификатор худшей находки выше порога E-value этой находки Идентификатор лучшей находки ниже порога E-value этой находки
1 24 P30334.1 0.004 P47908.2 3,00E-143
2 28 P9WMA8.1 3,00E-06 P47908.2 5,00E-88
3 28 P24694.1 4,00E-21 P47908.2 4,00E-82
4 28 P24694.1 4,00E-21 P47908.2 4,00E-82
К уже 4 итерации результаты стабилизировались. Можно предположить, что эти белки относятся к одному семейству так как вышепреведенне,обнаруженные белки оказались либо факторами гибернации рибосом, либо другими родственными белками, ассоциированными с рибосомами.