____________________________________________________________

МИНИ-ОБЗОР БАКТЕРИИ ACTINOMYCES FAECALIS

Автор: Каримова Ангелина Александровна

Студентка первого курса факультета биоинженерии и биоинформатики Московского государственного университета им. М.В.Ломоносова

АННОТАЦИЯ

Виды актиномицетов - это организмы, обитающие в почве и в микробиоте животных, включая человеческую микробиоту. Они известны тем, что играют важную роль в экологии почвы; они вырабатывают ряд ферментов, которые помогают расщеплять органический растительный материал, лигнин и хитин. В предложенном мини-проекте мы рассмотрели уникальные свойства генома бактерии Actinomyces faecalis

1 →ВВЕДЕНИЕ

Все бактерии рода Actinomyces грамположительные и факультативно анаэробные [1]. Виды Actinomyces могут образовывать эндоспоры, и хотя отдельные бактерии имеют палочковидную форму, колонии Actinomyces образуют грибовидные разветвленные сети гифов. Вид этих колоний изначально привел к неверному предположению, что организм был грибом, и к названию Actinomyces, "лучевой гриб" (от греческого actis, луч или балка, и mykes, гриб). Имеют вид тонких, диаметром от 0,2 до 1,0 мкм и длиной около 2,5 мкм, прямых или немного изогнутых палочек с утолщёнными концами. Часто образуют нити длиной до 10-50 мкм. Отличие актиномицетов от других бактерий — способность образовывать хорошо развитый мицелий [2]. Вид Actinomyces faecalis обитает в фекалиях животных, в частности, был выделен из фекалий Marmota himalayana (обнаружен в 2021 году) [3]

Таксономическое положение бактерии представлено в таблице 1.

Таблица1. Классификация бактерии Actinomyces faecalis [4]
Царство Bacteria
<Группа без ранга> Terrabacteria group
Тип Actinobacteria
Класс Actinobacteria
Порядок Actinomycetales
Семейство Actinomycetaceae
Род Actinomyces
Вид Actinomyces faecalis

2 →МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Данные генома бактерии Actinomyces faecalis были взяты из NCBI — Национального центра биотехнологической информации. Для выполнения работы был использован следующий файл:

Таблица особенностей (см. S1 сопроводительных материалов):

GCF_013184985.2_ASM1318498v2_feature_table.txt

Таблица особенностей была импортирована в Google sheets. Для построения диаграмм были использованы такие функции, как: =СЧЕТ, =СЧЕТЕСЛИ, =МАКС, =МИН, =СЧЕТЕСЛИМН.

Диаграмма длин белка (см. S3 сопроводительных материалов) была построена на основе выбранного диапазона (от 0 до 1350+ аминокислот, карман - 90 аминокислот) и значений, рассчитанных по формуле =СЧЕТЕСЛИМН.

Для построения гистограммы 2 (см. S4 сопроводительных материалов) сначала рассчитали расстояние, определили длину кармана (50) и рассчитали значения используя =СЧЕТЕСЛИМН.

С помощью функции MIN, MAX определили минимальное и максимальное процентное содержание GC. Исходя из полученных данных получили интервалы для построения гистограммы GC% по CDS (см. S5 сопроводительных материалов).

Для построения диаграммы, показывающей соотношение количества шести наиболее встречающихся белков в геноме Actinomyces faecalis (см. S6 сопроводительных материалов) был использован столбец N таблицы feature_table/ Для каждого белка было рассчитано количество его повторений с помощью функций ЕСЛИ, СЧЕТЕСЛИ. Затем мы выбрали 6 белков, которые присутствуют в геноме в большем количестве. На основе полученных данных построили диаграмму.

3 →РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Длины белков, закодированных в геноме бактерии.

На рисунке 1 в виде гистограммы представлена зависимость распределения числа белков от их длины.

Рис.1 Гистограмма длин белков в геноме Actinomyces faecalis, см. таблицу S2 сопроводительных материалов

Можно заметить, что длина большинства белков бактериального генома составляет 270-360 аминокислот. Это говорит о том, что в геноме встречаются по большей части короткие белки. Большинство таких белков отвечают за метаболические процессы.

3.2. Расстояние между кодирующими последовательностями.

На рисунке 2 приведена гистограмма расстояний между последовательностями на плюс-цепи самой большой хромосомы.

Рис.2 Гистограмма расстояний между CDS в геноме Actinomyces faecalis, см. таблицу S3 сопроводительных материалов

Исходя из данных, приведенных на рис.2, можно сделать вывод о том, кодирующая последовательность одного белка часто перекрывает кодирующую последовательность другого белка, т.е. расстояние <0. Далее мы видим стремительное уменьшение количества последовательностей при увеличении расстояния.

3.3. Процентное содержание гуанина и цитозина.

На рисунке 3 видно, что значения стремительно увеличиваются в интервале от 46.78 до 70.78. А в промежутке 68.78-70.78% содержания GC количество гуанина и цитозина достигает пика (506). Далее их значения стремительно уменьшаются. Между гуанином и цитозином существуют тройные связи, следовательно, большой процент содержания GC может свидетельствовать о более стабильной структуре ДНК, что может быть важно для поддержания целостности генома

Рис.3 Гистограмма GC% по CDS в геноме Actinomyces faecalis, см. S4 сопроводительных материалов.

3.4. Количество белков в геноме бактерии Actinomyces faecalis

В геноме бактерии содержится 2248 белков. Уникальных из них - 1361 (без повторяющихся). На диаграмме 4 мы показали 6 самых часто встречающихся белков.

Рис.4 Диаграмма количества встречающихся белков в геноме Actinomyces faecalis, см. S5 сопроводительных материалов.

Видно, что больший процент приходится на белок hypothetical protein. Hypothetical protein – это белки, функции которых не определены. Их процент в геноме бактерии Actinomyces faecalis равен 13,4786% от общего количества белков, 75,3731% от количества тех белков, которые представлены на диаграмме (LacI family DNA-binding transcriptional regulator, MFS transporter, ABC transporter ATP-binding protein, carbohydrate ABC transporter permease, sugar ABC transporter permease).

Второй белок по встречаемости: LacI family DNA-binding transcriptional regulator. Это транскрипционный регулятор, который выполняет функции активатора или репрессора. Он связывается со специфическим лигандом эффектора, который либо уменьшает, либо увеличивает сродство к ДНК.

4 →ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе данного мини-проекта были проделано исследование генома бактерии Actinomyces faecalis. Проведены следующие работы: построена гистограмма длин белка в кодирующих последовательностях, рассчитано процентное содержание гуанина и цитозина, расстояние между кодирующими последовательностями, подсчитано количество часто встречающихся белков в геноме бактерии.

5 →СОПРОВОДИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

S1. Feature table

future table

S2. Лист таблицы для построения гистограммы длин белка

гистограмма длин белка

S3. Лист таблицы для расчета расстояний между последовательными кодирующими последовательностями (CDS) на плюс-цепи хромосомы

расстояние между CDS

S4. Лист таблицы для построения гистограммы GC% по CDS

гистограмма GC% по CDS

S5. Лист с расчетами для построения диаграммы количества встречающихся белков в геноме бактерии

встречающиеся белки

6 →СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

[1] Кравец С.Л. 15 ноября 2022 года

[2] Actinomyces.Гастроскан.(2021)

3] Zhou J, Zhang S, Zhang G, Yang J, Lai XH, Pu J, Jin D, Lu S, Huang Y, Zhu W, et al. Characterization of isolates of members of the genus Actinomyces from Marmota himalayana: description of Actinomyces faecalis sp. nov., Actinomyces respiraculi sp. nov., and Actinomyces trachealis sp. nov. Int J Syst Evol Microbiol 2021; 71:4875.

[4] Zhou, J., Zhang, S., Zhang, G., Yang, J., Lai, X.-H., Pu, J., Jin, D., Lu, S., Huang, Y., Zhu, W., Huang, Y., Xu, M., Lei, W., Cheng, Y., Liu, L., and Xu, J. "Characterization of isolates of members of the genus Actinomyces from Marmota himalayana: description of Actinomyces faecalis sp. nov., Actinomyces respiraculi sp. nov., and Actinomyces trachealis sp. nov." Int. J. Syst. Evol. Microbiol. (2021) 71(7):004875.