Последовательности нуклеиновых кислот
Секвенирование по Сэнгеру. Хроматограмма
Для восстановления последовательности ДНК в образце необходимо дополнительно вручную проанализировать (так как программное оборудование допускает некоторые ошибки) полученную после секвенирования хроматограмму.
Для анализа и выполнения задания практикума №6 нам была выдана хроматограмма 24_F.
Длина хроматограммы 717 нуклеотидов
Начальный участок (0-24 нуклеотидов) и конечный (687-717 нуклеотидов) выделены светло-желтым цветом, что соответсвует низкому качеству и трудно читаемым участкам.
Уровень шума в среднем достаточно низкий, особенно в середине хроматограммы. Высокий уровень наблюдается лишь в некоторых коротких участках, например: 78-88.
Шума почти нет: 129-147.
Шум мешает интерпретации сигнала: 699-710.
Шум есть, но не мешает интерпретации сигнала: 674-686.
| № | Координаты проблемного участка | Причина | Решение | Фотография |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 1-18 | Начальный участок, высокий шум, большое количество NNN | Удалить фрагмент из анализа | ![]() |
| 2 | 20-24 | Смешение цветов, наложение пиков | Поставить N | ![]() |
| 3 | 119 ??????? | Слабый сигнал (возможно неполная амплификация) | Удалить нуклеотид | ![]() |
| 4 | 78-79 | Слишком высокий пик, частичное перекрывание со следующим | Поставить N | ![]() |
| 5 | 687 | Наложение пиков | Поставить N/воспользоваться расширенным алфавитом (С/Т можно заменить на Y) | ![]() |



