Последовательности нуклеиновых кислот

Секвенирование по Сэнгеру. Хроматограмма

Для восстановления последовательности ДНК в образце необходимо дополнительно вручную проанализировать (так как программное оборудование допускает некоторые ошибки) полученную после секвенирования хроматограмму.

Для анализа и выполнения задания практикума №6 нам была выдана хроматограмма 24_F.

Длина хроматограммы 717 нуклеотидов

Начальный участок (0-24 нуклеотидов) и конечный (687-717 нуклеотидов) выделены светло-желтым цветом, что соответсвует низкому качеству и трудно читаемым участкам.

Рис.1 Начальный участок (0-24 нуклеотидов)
Рис.2 Конечный (687-717 нуклеотидов) участок

Уровень шума в среднем достаточно низкий, особенно в середине хроматограммы. Высокий уровень наблюдается лишь в некоторых коротких участках, например: 78-88.

Шума почти нет: 129-147.

Шум мешает интерпретации сигнала: 699-710.

Шум есть, но не мешает интерпретации сигнала: 674-686.

Рис.3 Шума почти нет
Рис.4 Шум мешает интерпретации сигнала
Рис.5 Шум есть, но не мешает интерпретации
Таблица 1. Характеристика структур
Координаты проблемного участка Причина Решение Фотография
1 1-18 Начальный участок, высокий шум, большое количество NNN Удалить фрагмент из анализа
2 20-24 Смешение цветов, наложение пиков Поставить N
3 119 ??????? Слабый сигнал (возможно неполная амплификация) Удалить нуклеотид
4 78-79 Слишком высокий пик, частичное перекрывание со следующим Поставить N
5 687 Наложение пиков Поставить N/воспользоваться расширенным алфавитом (С/Т можно заменить на Y)