Практикум 3: рассеяние на кристалле, разрешение
гармоники, разрешение структуры, фазовая проблема
- Статья о структуре 1doz "Structural and Mechanistic Basis of Porphyrin Metallation by Ferrochelatase"
- Гомологи 1doz.
- Характеристика белка
- a. Феррохелатаза, фермент, катализирующий металлирование порфирина IX на последней стадии биосинтеза гема,
был ко-кристаллизован с изомерной смесью сильного ингибитора N-метилмезопорфирина (N-MeMP).
Ренгеноструктура выявила активный сайт белка, к которому связывается один из изомеров, что позволило охарактеризовать
нарушение макроцикла порфирина из-за инактивации феррохелатазы.
Структура феррохелатазы и N-MeMP закристаллизованы в присутствии Cu2+, это привело к металлированию и
деметелированию N-MeMP. Предложен механизм нарушения цикла порфирина.
- b. Разрешение структуры - 20.0-1.8
- c. Фазовая проблема решена методом молекулярного замещения.
- d. 27 034 структурных факторов измерено и 91.0 % имеют силу сигнала более 3.0
- e. R-factor - 17.7 % (R-free - 20.5 %)
Выравнивание, построенное с помощью программы JalView:
>1DOZ:A|PDBID|CHAIN|SEQUENCE/1-309
-SRKKMGLLVMAYGTPYKEEDIERYYTHIRRGRKPEPEMLQDLKDRYEAIGGISPLAQITEQQAHNLEQHLN
EIQDEITFKAYIGLKHIEPFIEDAVAEMHKDGITEAVSIVLAPHFSTFSVQSYNKRAKEEAEKLGGLTITSV
ESWYDEPKFVTYWVDRVKETYASMPEDERENAMLIVSAHSLPEKIKEFGDPYPDQLHESAKLIAEGAGVSEY
AVGWQSEGNTPDPWLGPDVQDLTRDLFEQKGYQAFVYVPVGFVADHLEVLYDNDYECKVVTDDIGASYYRPE
MPNAKPEFIDALATVVLKKLGR
>sp|P32396|HEMH_BACSU/1-310 Ferrochelatase OS=Bacillus subtilis (strain 168) GN=hemH PE=1 SV=1
MSRKKMGLLVMAYGTPYKEEDIERYYTHIRRGRKPEPEMLQDLKDRYEAIGGISPLAQITEQQAHNLEQHLN
EIQDEITFKAYIGLKHIEPFIEDAVAEMHKDGITEAVSIVLAPHFSTFSVQSYNKRAKEEAEKLGGLTITSV
ESWYDEPKFVTYWVDRVKETYASMPEDERENAMLIVSAHSLPEKIKEFGDPYPDQLHESAKLIAEGAGVSEY
AVGWQSEGNTPDPWLGPDVQDLTRDLFEQKGYQAFVYVPVGFVADHLEVLYDNDYECKVVTDDIGASYYRPE
MPNAKPEFIDALATVVLKKLGR
Последовательность в pdb отличается только отсутствием первого метионина. Все остальные остатки идентичны.
Седьмой семестр
© Migur Anzhela 2012
|