PSI-BLAST

ζ-кристаллин

ζ-кристаллин (Zeta-crystallin) представляет собой пример многофункционального белка (moonlighting protein). Одна и та же полипептидная цепь выполняет две различные функции: структурную — участие в формировании прозрачности хрусталика глаза у морской свинки, верблюда, ламы, дегу, моко и у Hyla japonica (японской древесной лягушки) и ферментативную — НАДФ-зависимая хинонредуктаза, EC 1.6.5.5 (Рис.1). У человека и большинства млекопитающих ζ-кристаллин не является мажорным белком хрусталика, но экспрессируется в печени, почках и мозге, играя ключевую роль в детоксикации ксенобиотиков и защите от окислительного стресса. Cтраница о гене зета-кристаллина в Human Protein Atlas

Рис.1 Реакция восстановления хинолина, катализируемая ζ-кристаллином

В UniProtKB нашли зета-кристаллин морской свинки
UniProt ID: P11415
Uniprot Entry: QOR_CAVPO

Итерация PSI-BLAST Всего находок Находок с E-value< 0.005 Новые находки
1 615 582 Zeta-crystallin из разных животных,
различные NADH-зависимые оксиредуктазы и другие red/ox ферменты,
Trans-enoyl reductase grgB,
Zinc-type alcohol dehydrogenase-like protein,
Highly reducing polyketide synthase gloL
2 964 914 L-threonine 3-dehydrogenas,
Alcohol dehydrogenase 1,
Алкагольдегидрогеназ-подобные белки
3 1334 1101 Ribosomal protein L11 methyltransferase
и много белков, связанных с убихиноном.
4 2343 1933 другие Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase,
Ribosomal protein L11 methyltransferase
5 3394 3109 Protein-L-isoaspartate O-methyltransferase (L-isoaspartyl methyltransferase),
Ubiquinone/menaquinone biosynthesys C-methyltransferase

После пятой итерации нашлось очень много разных белков, решили прекратить поиск.

         Первоначально среди идентифицированных белков преобладали ферменты, проявляющие редокс-активность по отношению к альдегидам, поликетидам, гидроксилированным органическим соединениям и убихинонам. Впоследствии к ним добавились белки с метилтрансферазной функцией, а также другие участники биосинтеза убихинона. Показательно, что наш ζ-кристаллин демонстрирует каталитическую активность в отношении хинолина. В целом в выборке доминируют ферменты с восстановительной активностью, что полностью согласуется с каталитическими свойствами ζ-кристаллина, представленными на Рис. 1

Доказанным предком ζ-кристаллина является NADPH-зависимая хиноноксидоредуктаза VAT1 - VAT-1 в swiss-prot (выравнивание NADPH-dependent quinone oxidoreductase VAT1). В выдаче, отсортированной по E-value, этот белок Danio rerio занимает двенадцатую позицию. Примечательно, что между ним и ζ-кристаллинами располагаются три фермента Reducing polyketide synthase FUB1 , обладающие восстанавливающей активностью по отношению к поликетидам — соединениям, структурно близким к хинолину. Как и хинолин, поликетиды представляют собой циклические вторичные метаболиты, содержащие кето-группы.

Ещё в выдаче часто появляются L-threonine 3-dehydrogenase (TDH_PROMH) и Alcohol dehydrogenase 1 (ADH1_ASPFL). Они являются предками других кристаллинов.
Примеры того как они выравниваются к нашей изначальной последовательности доступны по ссылкам.
Множественное выравнивание