Добро пожаловать на учебный сайт Аркуша Вероники

ДНК-белковые взаимодействия и структура тРНК.

Задание 1

Программа RNA fold, основанная на алгоритме Зукера, выдала результаты почти совпадающие с действительностью, за исключением акцепторной шпильки, отличающейся от реальной на одну пару нуклеотидов. Программа einverted выдала только акцепторную шпильку, причём такую же как RNA fold.

Таблица 1. Сравнение выдачей программ einverted и RNA fold

Участок структуры

find_pairs

Einverted

ViennaRNA

Акцепторный стебель

G2-A7 U65-C70

U1-A7 U65-A71

U1-A7 U65-A71

D-стебель

G10-C12 G22-C24

-

G10-C12 G22-C24

T-стебель

C48-G52 C60-G64

-

C48-G52 C60-G64

Антикодоновый стебель

С26-A30 U38-G42

-

С26-A30 U38-G42

Общее число каноничских пар

19

7?

20


Рис.1 Структура тРНК 'клеверный лист',
выданная программой RNA fold



Задание 2

Заданный для анализа комплекс ДНК-белок - 1p47. Имеется скрипт в JMol для определения множества атомов set1 (кислород 2'-дезоксирибозы), set2 (кислород в остатке фосфорной кислоты) и set3 (азот в азотистых основаниях), а также последовательного изображения ДНК c выделенными множествами атомов.


Для выполнения следующего упражнения использовался пользовательский скрипт PyMol. Данная мне структура представляла собой двухцепочечную ДНК, связанную с белком. В качестве ДНК связывающего мотива у белка присутствуют цинковые пальцы. Примечательно, что почти все взаимодействия по азотистым основаниям проходят по большой бороздке.

Таблица 2.  Качественный и количественный анализ ДНК-белковых взаимодействий.

Контакты атомов белка

Полярные

Неполярные

Всего

остатки 2'-дезоксирибозы

2

34

36

остатки фосфорной кислоты

19

21

40

Остатки АО большая бороздка

25

83

108

Остатки АО малая бороздка

0

1

1



Задание 3

Пользуясь программой nucplot на сервере кодомо была получена визуализация контактов ДНК с остатками аминокислот белка на трёх страницах, представленых ниже.

Рис.2-4
счастья вам





Задание 4

Остатками с наибольшим количеством связей с ДНК являются Arg124, Arg146, Arg180. Визуализация контактов с ДНК представлена на рисунках ниже.

Рис.5 Arg124(A) c G10
Рис.6 Arg146(A) c G9
Рис.7 Arg180(B) c G13


Конкретно с азотистыми основаниями имеют связи остатки: Arg180;Arg174;Lys183;His149;Arg146;Arg124;Asp176;Arg118;Asp120;Asp148. Выделить из них какое-то одно конкретное наиболее важное основание представляется довольно сложной и неочевидной задачей. Могу лишь предположить, что это один из упомянутых выше Аргининов+Arg118+His149, в связи с тем что остатки распознают последовательность из расположенных близко пяти гуанинов (пять из шести идущих подряд нуклеотидов гуанины, вероятность такого события близится к одной десятитысичной, что уже может свидетельствовать о какой-то минимальной специфичности связывания).