Практикум 10. Выравнивание как отражение эволюции. JalView |
Задание 1. |
Рисунок 1. Выравнивание белков семейства HSP70.
|
На рисунке отражено выравнивание шести гомологичных белков семейства HSP70, по два из бактерий, архей и эукариот. Также размечены примеры разных типов консервативности: консервативных на 80% или более (C), абсолютно функционально консервативных (F), позиций с гэпами (G).
Я выбрала белки с индентификаторами DNAK_HALWD, DNAK_HALS3 (бактерии), DNAK_MYCBP и DNAK_MYCS2 (археи), DNAK_HUMAN и DNAK_MOUSE (эукариоты).
Была использована программа Muscle. |
Ссылка на выравнивание.
|
| идентификатор | длина выравнивания | identity | identity, % | similarity | similarity,% | число гэпов | длина гэпов | гэпы, % |
число позиций консервативных на 70% и более | процент позиций консервативных на 70% и более |
DNAK_HALWD | 734 | 203 | 27,6 | 303 | 41,2 | 13 | 49 | 6,6 | 331 | 45,1 |
DNAK_HALS3 | - | - | - | - | - | 14 | 57 | 7,7 | 339 | 46,2 |
DNAK_MYCBP | - | - | - | - | - | 13 | 61 | 8,3 | 358 | 48,7 |
DNAK_MYCS2 | - | - | - | - | - | 10 | 66 | 8,9 | 360 | 49,3 |
DNAK_HUMAN | - | - | - | - | - | 8 | 45 | 6,1 | 266 | 36,2 |
DNAK_MOUSE | - | - | - | - | - | 13 | 55 | 7,4 | 312 | 42,5 |
|
Задание 2.
В качестве исходного белка была взята последовательность первых 120 аминокислотных остатков шаперонного белка DNAK_HALWD Q18GZ4 бактерии Haloquadratum walsbyi.
Была смоделирована эволюция - внесение семи точечных мутаций за поколение. Всего было получено семь поколений.Ссылка на скрипт.
Ссылка на выравнивание.
Некоторые ошики были исправлены вручную.Ссылка на выравнивание.
В частности глицин в 10 позиции в первых двух последовательностях не гомологичен метионину, также как и глицин третьей последовательности в 11 позиции не гомологичен серину.
Было показано, что тирозин в 13 позиции был утерян в 4 поколении и не является гомологичным изолейцину. И т.д(было исправлено выравнивание полностью).
Рисунок 2. Выравнивание с помощью программы T-coffee(сверху) и исправленное вручную(снизу).
|
Таблица2. Описание мутаций первых 50 позиций.
| поколение | номер позиции | сущность |
p1-p2 | 3 | вставка аланина |
p2-p3 | 10 | вставка метионина |
p3-p4 | 7 | замена изолейцина на глицин |
p6-p7 | 11 | вставка серина |
p3-p4 | 14 | выпадание тирозина |
p3-p4 | 16 | выпадание лейцина |
p5-p6 | 28 | замена глицина на треонин |
p5-p6 | 31 | замена фенилаланина на глутамат |
p1-p2 | 36 | вставка лизина |
p5-p6 | 37 | вставка лизина |
p1-p2 | 46 | выпадение фенилаланина |
p6-p7 | 48 | замена глутамина на глутамат |
p6-p7 | 49 | замена валина на глутамин |
|