Практикум 8

  1. Выбор и скачивание протеомов
  2. Референсный протеом для рода Methanothermococcus (Proteome ID UP000766671) имеет целых 46% ортологичных генов со статусом missing, поэтому вряд ли хорошо описывает эту архею.

    Среди протеомов, которые находятся по запросу (taxonomy_id:155862) AND (busco:[70 TO 100]) нет сильно выпадающих по размеру. Вряд ли они радикально различаются, но я выбрала протеом, имеющий наименьшее количество отсутствующих ортологичных генов (1.5%) и статус CPD Standard (Proteome ID UP000009296).

    Есть также протеом археи Methanococcus maripaludis (Proteome ID UP000000590) из того же семейства Methanococcaceae (запрос (taxonomy_id:2183) NOT (cpd:5) AND (busco:[70 TO 100])), и он референсный. Эта архея мезофильная, в отличие от термофильной Methanothermococcus okinawensis, поэтому пусть этот протеом будет контрольным.

  3. Сравнение протеомов по представленности определенных групп белков
  4. "Функциональные группы" Команда bash Количество белков в протеоме Methanothermococcus okinawensis (всего 1583 белка) Доля белков в протеоме M. okinawensis Количество белков в протеоме Methanococcus maripaludis (всего 1722 белка) Доля белков в протеоме M. maripaludis
    трансмембранные белки zgrep '^KW' | grep 'Transmembrane' | wc -l 564 0,356 614 0,357
    ферменты zgrep '^DE' filename | grep 'EC=' | wc -l 487 0,308 562 0,326
    гираза и связанные с ней белки - 3 0,002 1 0,0006

    Последнюю группу ферментов искать при помощи скрипта bash оказалось не очень легко, так как информация содержится в очень разных частях записей, и их оказалось всего несколько, поэтому поиск был по запросам (proteome:UP000009296) AND gyrase и (proteome:UP000000590) and gyrase соответственно.

  5. Сравнение протеомов
  6. Ссылка на Google colab.

    Для термофилов характерен ряд адаптаций, помогающих сохранять структуру белков при высоких температурах (третичная структура не приспособленных к высоким температурам белков при высоких температурах разрушается, и гидрофобные ядра белков могут "слипаться").[1]

    В том числе для них более характерно образование четвертичных структур, но на примере этих двух архей этого нельзя увидеть.

    Количество субъединиц Количество белков
    Methanothermococcus okinawensis Methanococcus maripaludis
    2 30 33
    3 9 8
    4 22 22
    5 1 1
    6 9 10
    7 - 11 0 0
    12 2 4
    Суммарное количество 75 82
    Доля суммы в общем количестве белков 0.0474 0.0476

    Кроме того, для белков термофильных организмов характерно большее количество крупных гидрофобных аминокислот (Phe, Ile, Leu, Met, Val, частично гидрофобный Trp), что позволяет образовать более прочное ядро. Для этого же эти белки имеют большее количество дисульфидных связей и солевых мостиков, но это не получится оценить по последовательности. Однако здесь не видно каких-то сильных раличий.

    M. okinawensis M. maripaludis
    Среднее арифметическое по содержанию больших гидрофобных аминокислот 0.3358 0.3253
    Медиана 0.3282 0.3195

    Оптимум роста для Methanothermococcus okinawensis равен 60-65°C[2], а для Methanococcus maripaludis - примерно 38°C[3]. Возможно, различие оптимума в 25°C не так заметно отражается на сравниваемых величинах (возможно, данных слишком мало, и это всё просто не имеет смысла).

References

  1. Christopher J. Reed et al. (2013) Protein Adaptations in Archaeal Extremophiles doi: 10.1155/2013/373275
  2. Ken Takai et al. (2002) Methanothermococcus okinawensis sp. nov., a thermophilic, methane-producing archaeon isolated from a Western Pacific deep-sea hydrothermal vent system doi: 10.1099/ijs.0.02106-0
  3. Jones, W.J., Paynter, M.J.B. & Gupta, R. Characterization of Methanococcus maripaludis sp. nov., a new methanogen isolated from salt marsh sediment. Arch. Microbiol. 135, 91–97 (1983). https://doi.org/10.1007/BF00408015