На главную

Третий семестр

Занятие 4. Поиск гомологов некодирующей нуклеотидной последовательности

Определение тРНК, которая была (скорее всего) использована рибосомой при присоединении 4-ого аминокислотного остатка к растущей цепи белка SYH_ECOLI.

Таблица 1. Выбор тРНК

 Аминокислотный остаток в 4-ой позиции белка SYH_ECOLI N
 Соответствующий кодон в гене hisS 5'-AAC-3'
 Идеальный антикодон 5'-GUU-3'
 Сколько можно было бы ожидать разных тРНК для остатка N
(если опираться на генетический код)?
2
 Сколько тРНК для остатка N аннотировано в геноме кишечной палочки? 4
 Характеристика выбранной для дальнейшего изучения тРНК:
 название гена asnT
 координаты гена в записи EMBL 2042573..2042648-->
 антикодон 5'-GUU-3'

Хотя аспарагин может кодироваться всего двумя кодонами, в геноме кишечной палочки аннотировано четыре тРНК. В живых организмах избыточность - частый случай, и это еще один пример.

Команда для поиска антикодона:

grep "anticodon.*Asn" ecoli.embl >search

Результаты поиска:

FT                   /anticodon=(pos:2042606..2042608,aa:Asn)
FT                   /anticodon=(pos:2056091..2056093,aa:Asn)
FT                   /anticodon=(pos:2057908..2057910,aa:Asn)
FT                   /anticodon=(pos:2060317..2060319,aa:Asn)

Поиск гомологичных тРНК в геноме архебактерии

Таблица 2. Поиск в геноме < Pyrococcus furiosus> последовательностей, сходных с  <аспарагиновой>  тРНК E.coli

Программа FastA BLASTN MegaBLAST Discontigous
MegaBLAST
Число находок с Е-value < 0,001 3 0 0 0
Характеристика лучшей находки:
  E-value находки 1.7e-07 - - -
  Номер сектора генома 116 из 173 - - -
  AC соответствующей записи EMBL AE010241 - - -
  координаты выравнивания(-ий) в записи EMBL 2275-2349--> - - -
Аннотация лучшей находки по EMBL аспарагиновая тРНК - - -

Использованные команды:

fasta35 trna.fasta pf_genome.fasta 6

formatdb -i pf_genome.fasta -n pf -p F

blastall -p blastn -d pf -i trna.fasta -o blastn -e 0.001

megablast -d pf -i trna.fasta -o megabl -e 0.001

megablast -d pf -i trna.fasta -o Dmegabl -e 0.001 -W 11 -t 21 -N 2

Сходные гены с e-value меньше 0.001 были найдены только программой fastA. Из всех программ она задает наименьшую длину слова - 6 н.о. Такой параметр определяет наибольшую чувствительность программы fastA.

На главную


© Даниленко Светлана