Практикум 5.Ферменты и метаболические пути. База данных KEGG.Задание 1.Необходимо проверить, являются ли члены разных ортологических рядов KEGG гомологичными белками, и проанализировать их филогенетические отношения. Для этого я взяла метаболизм простых эфиров. Рис1.Метаболический путь простых эфиров с реакцией R04321Там выбрала реакцию R04321, которую катализирует 2 ортологических ряда белков. Их идентификаторы и ссылки с KEGG ORTHOLOGY: K00994, K13644. Количество белков K00994: 30; K13644: 43. Множественное выравнивание белков двух ортологических рядов, построенное с помощью программы Muscle. (здесь) Проект множественного выравнивания с покраской BLOSUM62. (здесь) Гомологичность белков в вырвнивании: множественное выравнивание существует, видно много косервативных позиций, причем часть из них абсолютно консервативные. В выравнивании были белки, которые выравнились плохо из-за небольшой длины, пэтому присутствуют гепы, однако были и последовательности, которые не были выравнены в блоках. Дерево было построено при помощи программы MEGA, методом Neighbor-Joining, со 100 бутстреп-репликами Рис2.Дерево белковПо построенному дереву видно, что оно расподается на две клады, которые соответствуют отдельным ортологическим рядам.Так же величина поддержки бутстрепом у ветви составляет 99. Кроме этого, есть ветвь, которая сильно выделяется среди остальных A0A067CW68_SAPPC|K13644, в выравнивании эта последовательность и вправду выравнена немного хуже.
Задание 3.Я взяла метаболизм простых эфиров(рисунок 3) Рис 3.Метаболический путь простых эфировЭфиры являются консервантами, антиоксиданами, применяются в парфюмерной промышленности. Некоторые простые эфиры обладают инсектицидным действием. Путь начинается с сульфогликолипидов и заканчивается сульфатидами. Из списка организмов, доступных для рассмотрения в БД KEGG, я выбрала 3 организма: 1.Эукариота Candida albicans SC5314(рисунок 4-6) Рис 4.Candida albicans SC5314,информация KEGG
Рис 6.Метаболический путь Candida albicans SC53142.Архея Methanocaldococcus jannaschii.(рисунок 7-8) Рис 7.Methanocaldococcus jannaschii,информация KEGGМетаболический путь не обнаружен Рис 8.В метаболизме липидов отсутствует метаболиз простых эфиров3.Бактерия Shigella sonnei 53G - Шигелла Зонне (риснуок 9-11) Рис 9.Shigella sonnei 53G,информация KEGGРис 10.Метаболизм липидовРис 11.Метаболический путь Shigella sonnei 53GЧего общего в метаболических картах: фермент 3.1.1.4. Огранизмы могут осуществлять отдельные части данного метаболического пути. По мере усложнения организма(бактерия->эукариота) все больше частей пути становится задействованно. Задание 4.Реакиция в которой принимает участие СoA. Общая информация представлена здесь. Ее идентификатор R04363. На рисунке 12 представлена схема реакции. Под рисуноком название вещест. Рис 12.Схема реакции1-алкил-2-ацетил-глицерол + ацетил-CoA = CoA + 1-алкил-2-ацетил-3-ацил-глицерол. В ходе реакии происходит перенос ацетильной группы. Метаболический путь простых эфиров с выделенной реакцией изобрашен на рисунке 13. Рис 13.Метаболический путь с покрашенной реакцией - желтый
|