Практикум 7 и 8

Starkeya Novella

Starkeya novella является членами семейства Xanthobacteraceae в порядке «Rhizobiales», который до сих пор плохо характеризуется на уровне генома. Культуры этого вида наиболее интересны из-за их факультативно хемолитоавтотрофного образа жизни, который позволяет им как потреблять углекислый газ, так и производить его. Эта особенность делает S. novella интересным модельным организмом для изучения геномных основ регуляторных сетей, необходимых для перехода между потреблением и производством углекислого газа, ключевого компонента глобального углеродного цикла. Кроме того, S. novella представляет интерес из-за своей способности расти на различных неорганических соединениях серы и нескольких соединениях C1, таких как метанол. Помимо Azorhizobium caulinodans, S. novella является лишь вторым видом в семействе Xanthobacteraceae с полностью секвенированным геномом типового штамма.(2)

Цитохромы из семейства SoxAX играют важную роль в окислении тиосульфата через мультиферментную систему, окисляющую тиосульфат (TOMES). Ранее охарактеризованные белки SoxAX из Rhodovulum sulfidophilum и Paracoccus pantotrophus содержат три группы гема с, две из которых расположены на субъединице SoxA. ЭПР-спектроскопия показала, что обе группы трехвалентного гема находятся в состоянии с низким спином, и спектры соответствовали тому, что один гем имеет аксиальную лигатуру His / Cys, а другой имеет аксиальную лигатуру His / Met. Лигированный His/Cys гем присутствует в различных конформационных состояниях и дает начало трем различным сигналам. Аминокислотное секвенирование использовали для однозначного отнесения белка к кодирующим генам soxAX, которые являются частью полного кластера генов sox, обнаруженного у S. novella. Филогенетический анализ последовательностей генов, связанных с soxA и soxX, указывает на параллельное развитие SoxA и SoxX, при этом дигемные и моногемные последовательности SoxA расположены на четко разделенных ветвях филогенетического дерева.(1)

S-тиосульфотрансфераза L-цистеина

Цитохромы из семейства SoxAX играют важную роль в окислении тиосульфата через тиосульфат-окислительную мультиферментную систему (TOMES). Было обнаружено, что белок SoxAX, очищенный из новеллы Starkeya, содержит только две группы гема.

Базовая информация записи

ID:SOXA_STAND

AC:D7A6E5; Q7BQR6

Name:L-cysteine S-thiosulfotransferase subunit SoxA

Organism:Starkeya Novella

TaxID:639283

INSDC:

PDB:30A8;30CD

Length:275 aa

MW:30684 Da

Кластеры, в которые входит белок

ID:UniRef100_D7BQR6

Size:1

Length:275

Name:L-cysteine S-thiosulfotransferase subunit SoxA


ID:UniRef90_D7BQR6

Size:6

Length:275 aa

Name:L-cysteine S-thiosulfotransferase subunit SoxA


ID:UniRef50_D7BQR6

Size:148

Length:275

Name:L-cysteine S-thiosulfotransferase subunit SoxA

Выбор и скачивание протеома

Сначала я нашел 2 необходимыхх мне протеома: протеом Starkeya Novella (UP000006633) и контрольный протеом родственного организма, я выбрал Xanthobacter autotrophicus (UP000002417). Оба протеома не вызывают опасений, тк имеют 100% и 99,4% полностью отсеквенированных генов. В протеоме Starkeya Novella : 4424 белка, из которых только 8 в базе данных Swiss-Prot и только 2 имеют построенную 3d структуру. У Xanthobacter autotrophicus : всего - 4971 белок, в Swiss-prot - 244, имеют построенную 3d структуру - 11.

Протеомы я скачал с помошью команды wget 'https://rest.uniprot.org/uniprotkb/stream?compressed=true&download=true&format=txt&query=%28%28proteome%3AUP000006633%29%29' -O UP000006633.swiss.gz

Сравнение протеомов по представленности определенных групп белков

Я сравнивал число белков, входящих в разные "Функциональные группы"с помощью запросов к Proteomes.

Функциональная группа Starkeya Novella Xanthobacter Autotrophicus
Трансмембранные белки 935 972
Ферменты 42 55
Налечие гена soxA 1 0

Количество трансмембранных белков и ферментов в протеомах родственных организмов в процентном соотношении практически не отличается: трансмембранные белки - 21,13% и 19,55% и ферменты - 0,95% и 1,11% соответственно.

Третье сравнение протеомов подчеркивает особенное умение Starkeya Novella окислять тиосульфат.

Команды:

(proteome:UP000002417) AND (keyword:KW-0812)

(proteome:UP000002417) AND (cc_function:Enzyme)

(proteome:UP000002417) AND (gene:soxA)

Сравнение протеомов по первым аминокислотам белков.

Все белки протеомов двух организмов начинаются с метионина.

Команда: zcat UP000006633.swiss.gz | seqret -filter 'swiss::stdin:*[1:1]' | grep -v '^>' | sort | uniq -c

Список литературы

1)Kappler U.,Aguey-Zinsou K.F.,Hanson G.R.,Bernhardt P.V.,McEvan A.G.-Cytochrome c551 from Starkeya novella: characterization, spectroscopic properties, and phylogeny of a diheme protein of the SoxAX family. PebMed.ncbi.nlm.nih.gov

2)Kappler U., Davenport K., Beatson S., Lucas S., Lapidus A., Copeland A., Berry K.W., Glavina Del Rio T., Hammon N., Dalin E., Tice H., Pitluck S., Richardson P., Bruce D., Goodwin L.A., Han C., Tapia R., Detter J.C., Chang Y.J., Jeffries C.D., Land M., Hauser L., Kyrpides N.C., Goker M., Ivanova N., Klenk H.P., Woyke T. Complete genome sequence of the facultatively chemolithoautotrophic and methylotrophic alpha Proteobacterium Starkeya novella type strain (ATCC 8093(T)). Europepmc.org