На главную страницу четвертого семестра

Занятие 4. Дополнительные задания.

  1. Jackknife-анализ достоверности ветвей: аналогично упражнению 6 предыдущего задания, но при получении реплик используют опцию "-test j":
      fseqboot ABCDEF.fasta -test j
      fdnaml abcdef.fseqboot -ttratio 0.5 -auto
      fconsense abcdef.treefile

    Консенсусное дерево имеет такую же топологию, что и полученное при бутстреп-анализе и исходное деревья. Достоверность внутренних ветвей при этом возросла, а достоверность "недостоверных" снизилась:
    Set (species in order)     How many times out of  100.00
    cdefba
    ....**                     100.00
    .***..                     89.00
    ..**..                     67.00
    
    Sets NOT included in consensus tree:
    
    Set (species in order)     How many times out of  100.00
    
    .*.*..                     23.00
    ................................
    .**...                      1.00
    Неукорененное дерево:
                           +------F
                    +-67.0-|
             +-89.0-|      +------E
             |      |
      +------|      +-------------D
      |      |
      |      |             +------A
      |      +-------100.0-|
      |                    +------B
      |
      +---------------------------C

     
  2. Укоренение дерева, реконструированного методом Neighbor-joining:
    fretree 6 NJ.treefile
    Команда приводит к появлению на экране картинки с деревом и предложения ввести какую-нибудь из однобуквенных команд. Команда M укореняет дерево в среднюю точку.
    Корень топологически поместился туда, где он был на исходном дереве.
                                                     ,--------------------------6:A
      ,----------------------------------------------7
      !                                              `--------1:B
      !
    -11                                                    ,--------------------4:E
      !                                             ,-----10
      !          ,----------------------------------9      `---------5:F
      !          !                                  !
      `----------8                                  `--------------3:D
                 !
                 `--------------------------------------2:C

     
  3. Создание изображения переукорененного дерева из предыдущего упражнения как филограммы (phenogram), ориентированной вправо, при помощи программы fdrawgram:
    drawgram -style p rNJ.treefile.
    Опция -style позволяет выбрать способ отображения дерева. Изображение:


     
  4. Восстановление предковой последовательность для мутированных последовательностей методом максимального правдоподобия (программой fdnamlk). Команда:
    fdnamlk ABCDEF.fasta -hypstate -ttratio 0.5
    Опция -hypstate заставляет программу восстанавливать последовательности во всех узлах, -ttratio - соотношение частот транзиций к числу трансверсий. Полученная предковая последовательность при выравнивании с геном deoC_ECOLI имеет 34%-ую идентичность. Выравнивание отражает отсутствие делеций и дупликаций: нет гэпов. Отсутствие ярко выраженных консервативных участков в гене подчеркивает случайный характер замен. Идентичность (34%) и сходство (36%) почти совпадают, поскольку все нуклеотиды менялись на любые другие (модель Джукса-Кантора). Интересно отметить, что последовательность гена выравнивается с полученными мутантами лучше, чем с предсказанным предком (т.е. действие по отысканию предка в нашем случае не привело к удовлеторительным результатам).
                A      B      C      D      E      F 
    
    U14003     43%    40%    39%    45%    45%    45%
               43%    40%    39%    45%    45%    45%
    Выравнивание гена и "предка"


©Хайруллин Альберт