РАбота с данными секвенатора

Описание данных

Файлы ab1: Прямое чтение, Обратное чтение.

Сравнительно читаемые участки: Прямое чтение -- 60-680 (нечитаемо40 нуклеотидов от конца). Обратное чтение -- 65-707 (нечитаемо 17 от конца). Качество обратного чтения кажется выше (более длинная читаемая последовательность и меньше шума). Шумы на участке чтения редко превышают 20% от основного сигнала, причем шум в обратном чтении ниже примерно в 1.5 раза. Интересные, но непонятные шумы в районе 20 нуклеотида в обоих хроматограммах.

Выравнивания

Файлы выравниваний: Выравнивание, Проект Jalview.

Проблемные нуклеотиды

Окрестности Описание
Здесь видим инсерцию или делецию нулеотида. На прямом чтении нет и следа цитозина. К сожалению, трудно судить, какая последовательность была изначально.
Широкий пик гуанина заслонил аденин, пик которого все равно довольно заметен. Заменен на а. Также пик g, возможно артефакт.
Высокий пик на хроматограмме обратного чтения, возможно, соответствует пику между двумя T, решил добавить G. Также удостоверился в том, что именно тимин находится в этом месте.

Плохая хроматограмма

Плохая хроматограмма

Размытые пики -- пятна красителя. Также видны гребни пиков T, похожие на проскальзывание. Наложение многих пиков свидетельствует, вероятно, о многих днк, которые попали в секвенатор. Возможно, это следствие неспецифичного праймера или его неправильного отжига в ходе ПЦР.


© Бушмакин Илья, 2017