Занятие 6. Домены. БД Pfam, InterPro.

  1. Исследование доменной структуры белка NadB_Ecoli
    1. Доменная структура белка NadB_Ecoli по данным Pfam
    2. В БД Pfam было найдено описание доменной организации моего белка. Резудьтат поиска прдеставлен в таблице:

      Доменная структура белка NadB_Ecoli по данным Pfam

      Cхема из Pfam:
      Пояснения к схеме
      Pfam AC Pfam ID Полное название семейства домена
      Положение в последовательности белка хххх_Ecoli Клан
      1. PF00890 FAD_binding_2 ФАД-связывающий домен 2 10-392 Клан NADP_Rossmann (CL0063),
      содержит 148 сем-ва,
      у 15-ти неизвестна функция
      2. PF02910 Succ_DH_flav_C Сукцинат дегидрогеназа-флавопротеин, С-концевой домен;
      принимает участие в аэробном росте
      440-526 нет

    3. Выравнивание-затравка (seed) для N-концевого домена моего белка (PF00890) в формате msf: FAD_binding.msf.

    4. Сравнение описания доменной структуры в Pfam с описанием в других БД
    5. В БД InterPro был проведен поиск доменов моего белка. По результатам поиска были выбраны описания всех подписей (signatures), интегрированных в InterPro, т.е. имеющих InterPro ID. Подпись, которая, на мой взгляд, наиболее отличается от подписей PFAM:

      Это подпись из БД PRINTS, ее InterPro ID: IPR013027.
      Как видно из картинки, подпись содержит два небольших мотива.
      Также InterPro содержит еще одну подпись, которая отличается от подписей PFAM:

      БД TIGRFAMs, InterPro ID: IPR005288.
      Этот домен является как бы объединением доменов FAD_binding 2 и Succ_DH_flav_C из Pfam.

    6. Сопоставление доменной структуры с 3D структурой моего белка
    7. Из Pfam было получено изображение 3D-структуры белка NadB_Ecoli (1knp.pdb):
      Розовым цветом выделен домен Succ_DH_flav_C, зеленым - FAD_binding 2. Структура в шарнирной модели - это лиганд флавинадениндинуклеотид. Домен FAD_binding 2 покрывает практически всю структуру, состоящую из бета-листов и альфа-спиралей. Домен Succ_DH_flav_C занимает 2 полные альфа-спирали и половину 3, и, таким образом, не покрывает структурный домен полностью. Еще одна альфа-спираль не попадает ни под один из доменов Pfam.

  2. Исследование эволюции отдельных доменов
    1. Частота встречаемости домена Succ_DH_flav_C белка NadB_Ecoli в различных организмах
    2. Домен FAD_binding_2 (PF00890)встречается в 1110 видах.
      Домен Succ_DH_flav_C (PF02910) встречается в 910 видах. По данным из его таксономического дерева PFAM была заполнена таблица:

      Представленность домена PF02910 в организмах разных видов

      Таксон
      Количество белков с доменом PF02910
      Эукариоты Зеленые растения 43
      Грибы 59
      Животные 106
      Остальные эукариоты 43
      Бактерии 2733
      Археи 98
      Как видно из таблицы домен Succ_DH_flav_C широко представлен как у прокариот, так и у эукариот.

    3. Частота встречемости доменов, представленных в белке NadB_Ecoli, в Escherichia coli K12
    4. Представленность изучаемых доменов в белках Escherichia coli (strain K12)

      PFAM ID Количество белков в Escherichia coli (strain K12)
      1. PF00890 4
      2 PF02910 3
      Количество белков с точно такой же доменной организацией как у NadB_Ecoli: 2 (FRDA_ECOLI и DHSA_ECOLI). Из таблицы видно, что оба домена встречаются в кишечной палочке довольно редко.

    5. Доменные перестройки
    6. Домен PF02910 (FAD_binding_2) встречается в сочетании с разными доменами, причем бывает как на N-, так и на С-конце последовательности.
      Q24U83_DESHY:
      Q8RPI7_DESHA:
      Также он встречается в однодоменных белках:
      3O1D_COMTE:
      В некоторых белках домен дуплицирован:
      C5LJM5_9ALVE:
      Как видим, последний домен состоит только из некоторой части изучаемого домена.
      Также встречаются белки, в которых последовательность домена имеет разрыв. Пример: C2DYT0_9LACO:

      Домен PF00890 (Succ_DH_flav_C) встречается как в многодоменных вариантах, так и в одноменных:
      DHSA1_ARATH
      Q8ZUX3_PYRAE :
      Иногда встречаются дупликации домена:
      B8BFH4_ORYSI:
Меню
· Главная
· Результаты исследований
· Семестры
· Полезные ссылки
· Контакты
© Ирина Поверенная, 2008