Практикум 11: Анализ доменного семейства TEA (PF01285)

1. Выбор и описание семейства доменов

Для проведения анализа из списка Pfam был выбран домен TEA (PF01285). Описание его характеристик приведено в таблице 1.

TEA-домены – это ДНК-связывающие участки протяженностью от 66 до 68 аминокислот, названные в честь двух белков: TEF-1 и AbaA. Благодаря своей компактной структуре, они обеспечивают высокую точность распознавания ДНК-мишеней внутри клетки. В частности, TEA-домены играют важную роль в одном из ключевых сигнальных путей – Hippo. Он отвечает за пролиферацию и дифференцировку клеток, а также регулирует размер органов. Большинство белков содержат только один TEA домен (обычно в N-концевой части). Домены этого семейства встречаются только у эукариот и имеют трёхспиральную глобулярную укладку типа «helix-turn-helix» (HTH), но с необычным удлинённым C-концом. Так же внутри домена есть участок для связывания с коактиваторами транскрипции YAP/TAZ (участники пути Hippo).

Таблица 1. Характеристики семейства доменов PF01285 из базы Pfam.
AC pfam PF01285
ID pfam TEA/ATTS domain
#SEED 33
#All 10k
#SW 25
#architectures 69
#3D 5
Taxonomy #eukaryota: 9584
#archaea: 0
#bacteria: 0

2. Описание выравнивания белковых доменов (seed)

Описание выравнивания приведено в таблице 2. Ознакомиться с ним можно, скачав файл с проектом Jalview по ссылке.

Таблица 2. Описание выравнивания белковых доменов (seed) с точки зрения гомологичности всех последовательностей или их подмножества.
Выравнивание seed 119 колонок, 33 последовательности
Максимальный достоверный блок, включающий ВСЕ последовательности (МДБ-all) 108-116*
100% консервативные колонки в МДБ-all 108:Q, 111:S, 114:Q
Максимальный достоверный блок, включающий НЕ ВСЕ последовательности (МДБ-notAll) колонки 100-117 (последовательности 24-33)
100% консервативные колонки в МДБ-notAll 100:T, 101:G, 104:R, 107:K, 108:Q, 111:S, 112:R, 114:Q, 116:L, 117:R
Участок без достоверных подблоков колонки 50-68

*Для выделения МДБ-all было найдено 2 подходящих участка одинаковой длины: 76-84 и 108-116. Работа проводилась с участком 108-116, так как в нем больше 100% консервативных колонок.

3. Построение карты локального сходства (dotplot)

Для построения dotplot были выбраны два белка с разной доменной архитектурой, содержащие домен TEA (см. Таблица 3).

Таблица 3. Информация о выбранных доменах и представляющих их белках.
Доменная архитектура 1 PF01285-PF17725
Белок с архитектурой 1 P30052
Доменная архитектура 2 PF01285
Белок с архитектурой 2 P18412
Dotplot последовательностей P30052 и P18412
Рис. 1. Карта локального сходства последовательностей P30052 и P18412.

Полученная карта локального сходства белков P30052 (содержит TEA- и YBD-домены) и P18412 (содержит только TEA-домен) указывает на гомологию последовательностей: видна четкая диагональ с двумя разрывами, которые соответствуют делециям или инсерциям, произошедшим в ходе эволюции.

← Назад к практикумам второго семестра