Практикум 7

Обзор:

1. Сравнение предсказаний трансмембранных участков в бета-листовом белке

Цель задания: сравнить результаты предсказаний трансмембранных участков по последовательности (с помощью DeepTMHMM) и по трехмерной структуре (база данных OPM) в β-листовом белке.

В качестве белка с трансмембранными бета-листами я выбрал рецептор пестицина FyuA (Рис 1.) (Pesticin receptor FyuA; 4epa; FYUA_YERPE) из чумной палочки (Yersinia pestis), который располагается во внешней мембране (это грамотрицательная бактерия). У этого белка известно две функции: собственно рецепция пестицина (бактериоцин, подавляющий рост других штаммов йерсинии), а также рецепция иерсиниабактина (это сидерофор - вещество, связывающееся с ионами железа во внешней среде для последующего поглощения).
Координаты трансмембранных участков белка, приведенные в OPM: 1( 140- 148), 2( 153- 161), 3( 170- 177), 4( 199- 207),
5( 214- 222), 6( 260- 267), 7( 272- 280), 8( 306- 313), 9( 320- 328), 10( 358- 367), 11( 374- 380), 12( 409- 417), 13( 425- 431),
14( 458- 465), 15( 472- 477), 16( 506- 513), 17( 519- 527),
18( 551- 560), 19( 567- 575), 20( 594- 601), 21( 609- 613),
22( 641- 649)

Рис. 1. Структура рецептора пестицина FyuA из внешней мембраны Yersinia pestis. (красным пунктиром обозначена наружняя сторона мембраны, синим - сторона, обращенная к периплазме).

Далее из OPM я перешел в UniProt и там нашел ссылку на аминокислотную последовательность белка в RefSeq, скачал её в формате fasta. Запустил с этой последовательностью DeepTMHMM.
Предсказанные программой координаты трансмембранных участков:
1(162-169), 2(176-183), 3(190-197), 4(223-229), 5(237-243), 6(283-289), 7(294-301), 8(329-335), 9(342-349), 10(382-390), 11(394-400), 12(434-441), 13(445-451), 14(482-488), 15(492-498), 16(530-537), 17(541-547), 18(575-581), 19(589-595), 20(618-625), 21(629-635), 22(665-672)
Файл с текстовой выдачей

Сравнение: границы трансмембранных участков, предсказанных по последовательности, похожи на предсказанные по структуре, однако сдвинуты примерно на 21-24 аминокислот. Вероятно, это связано с тем, что в зрелом белке отсутствует сигнальный участок, поэтому и в структуре его нет. Также есть небольшие колебания в длинах участков, но они всего в 1-3 аминокислоты. В обоих случаях предсказано 22 трансмембранных бета-листа. Таким образом, наверное, предсказания довольно надежны, раз уж они повторяются с помощью двух разных методов.

Рис. 2. Графическое отображение предсказаний DeepTMHMM для FYUA_YERPE.
Красные линии - трансмембранные участки
Оранжевая - сигнальный участок
Зеленые - участки, обращенные к периплазме
Голубые - внешние участки белка

2. Сравнение предсказаний трансмембранных участков в альфа-спиральном белке

Цель задания: сравнить результаты предсказаний трансмембранных участков по последовательности (с помощью DeepTMHMM) и по трехмерной структуре (база данных OPM) в α-спиральном белке.

Для этого задания мне был выдана первая структура транспортера цинка YiiP (Zinc transporter YiiP, structure 1; 3j1z; FIEF_SHEON) из внутренней мембраны грамотрицательной бактерии Shewanella oneidensis. По своей функции это танспортер катионов двухвалентных металлов, который экспортирует Zn2 + , Cd2 + и, возможно, Fe2 +, антипортер Zn2 + /H +, способный использовать движущую силу протона для удаления Zn2 + из цитоплазмы.
Для своей работы я выбрал цепь субъединицы P. Вот координаты ее трансмембранных участков:
1( 21- 37), 2( 43- 55), 3( 90- 110), 4( 120- 139), 5( 152- 166), 6(181- 196)

Рис. 3. Структура транспортера цинка YiiP из внутренней мембраны грамотрицательной бактерии Shewanella oneidensis. (красным пунктиром обозначена сторона мембраны, обращенная к периплазме, синим - сторона, обращенная к цитоплазме).

Дальнейшая последовательность действий была аналогична таковой для первого задания. Последовательность FIEF_SHEON в формате fasta
Вот предсказанные координаты трансмембранных альфа-спиралей:
1(14-36), 2(40-62), 3(82-103), 4(119-137), 5(160-173), 6(182-200)
Файл с текстовой выдачей

Сравнение: трансмембранных участков столько же (6). Некоторые участки довольно точно совпадают (например 4-й и 6-й), а другие не особо (как 5-й). Не знаю с чем это может быть связано. Наверное, просто разные методы тут выдают свои погрешности (или какой-то один из них).

Рис. 4. Графическое отображение предсказаний DeepTMHMM для FIEF_SHEON.
Красные линии - трансмембранные участки
Голубые - участки, обращенные к периплазме
Розовые - участки, обращенные к цитоплазме