PSI-BLAST



Файл с результатами работы в виде проекта программы Jalview: pr12.jvp.
Для выполнения заданий данного практикума была взята аминокислотная последовательность белка Pyrimidine operon attenuation protein/uracil phosphoribosyltransferase из организма бактерии Gordonibacter pamelaeae 7-10-1-b (идентификатор в базе данных RefSeq YP_007803476.1 - старый, WP_015540426 - новый). Данная последовательность доступна в формате fasta.

1) Поиск гомологов белка при помощи PSI-BLAST.

Таблица 1. Сравнение итераций программы PSI-BLAST.
Номер итерации Количество находок Количество новых находок ID лучшей находки Score лучшей находки E-value лучшей находки ID худшей находки Score худшей находки E-value худшей находки
1 181 - A5D172 63% 211 1e-67 A5ULLO 27% 40 0.005
2 1182 1001 A5D172 63% 270 5e-91 Q8FTD5 30% 30 10
3 141 -860 Q28DHO 18% 39.9 0.007 P45040 25% 30.1 9.8
4 1915 1774 A5D172 62% 181 7e-56 A1S1K8 25% 30.1 9.9
5 1918 3 Q43199 17% 174 4e-53 B7U179 14% 41.6 0.002
6 1918 0 A6UBS2 20% 177 2e-54 Q60216 18% 46.6 4e-05


Полученные последовательности в fasta-формате.

3) Построение множественного выравнивания с помощью программы muscle на сервере kodomo.

Было построено множественное выравнивание полученных 533 находок на сервере кодомо с помощью программы muscle (команда: muscle -in seqdump.fasta -out result.fasta -maxiters 2). Полученное выравнивание в формате fasta.


4) Построение множественного выравнивания типичных представителей данного семайства.

В данном задании было необходимо построить множественное выравнивание программой muscle уже не всех белков семейства, а специально отобранных. При помощи опции Remove redundancy было выбрано 8 последовательностей, гомологичные по всей длине (query cover больше 76%) с E-value меньшем 1e-3. Полученное выравнивание в fasta-формате.


5) Построение множественного выравнивания типичных представителей данного семайства.

При помощи программы mafft было построено множественное выравнивание тех же последовательностей. Была использована команда: mafft 8.fasta > seq8.fasta.

6) Сравнение выравниваний.

Было проведено сравнение выравниваний. Для этого при помощи программы muscle было построено выравнивание двух выравниваний (команда: muscle -profile -in1 8.fasta -in2 seq8.fasta -out s_m.fasta). Полученное выравнивание в fasta-формате..

СПАСИБО ЗА ПРОСМОТР


© Мария Медведева