| Запрос | Запрос как его понял PubMed из Search details (translations) | Всего находок | Всего в открытом доступе | Всего обзоров |
| p100 [ti] | p100 [ti] | 164 | 38 | 2 |
| p100[ti] AND protein[ti] | p100[ti] AND protein[ti] | 29 | 7 | нет |
| (((p100[Title/Abstract]) AND novel) AND (cellular OR nuclear)) AND coactivator | Cellular= "cells"[MeSH Terms] OR "cells"[All Fields] OR "cellular"[All Fields] | 8 | 4 | нет |
| Related Citations for PubMed (Select 9207457) | p100: a novel proliferation-associated nuclear protein specifically restricted to cell cycle phases S, G2, and M. (related citations) | 107 | ? | 5 |
| ((p100[Title/Abstract]) AND transcriptional) AND (activator or coactivator) | Transcriptional="transcription, genetic"[MeSH Terms] OR ("transcription"[All Fields] AND "genetic"[All Fields]) OR "genetic transcription"[All Fields] OR "transcriptional"[All Fields] | 34 | 11 | 1 |
Скачать статью можно по данной ссылке.
В ядрах эпителиальных клеток молочных желез присутствует белок-коактиватор p100. В ответ на пролактин в культуре и тканях молочных желез во время лактации его присутствие увеличивается.
Introduction
Впервые p100 был открыт в клетках HeLa из-за его способности взаимодействовать с вирусным фактором транскрипции (EBNA-2) и одним из компонентов комплекса, участвующего в инициации транскрипции - фактором IIE. Но его роль в физиологических процессах оставалась неясна. Другие факторы, с которыми взаимодействует p100, так или иначе связаны с ростом и дифференциацией. Анализ последовательности этого белка показал, что он содержит 4 повторяющихся домена. Похожую структуру имеет белок Drosophila, который функционирует в период оогенеза.
Целью работы было определить белки, которые играют роль в период лактации. Причем их экспрессия должна была изменяться в периоды лактации и ее отсутствия. Было обнаружено, что p100 присутствует в секретирующих молоко клетках: в эндоплазматическом ритикулуме и каплях липидов. На повышение количества p100 в культурах тканей влияют лактогенетические стимуляторы, а также существенно оно существенно изменяется в периоды беременности и кормления.
Materials and methods
При проведении исследования были использованы ткани коровьих и мышиных (у них вырезались 4-е и 5-е железы на разных этапах беременности, вскармливания и отнимания) молочных желез. Далее для исследования специальным образом подготавливались культуры тканей.
Были использованы методы пептидного микросеквенирования, использования антител белка p100, Western blotting, имунногистохимические методы, методы субклеточного фракционирования, а также анализ РНК.
Results
В результате лактации молочных желез появляется избыток коактиватора p100. Различными методами было доказано, что ткани молочных желез содержат транскрипционный коактиватор p100, а в период лактации его количество значительно превосходит обычное.
Чтобы доказать, что концентрация p100 в тканях зависит от циклов беременности и лактации, ткани для исследования отбирались у животных в разное время цикла. В начале беременности у крыс реакция с p100 была только немного повышена, ко дню родов же она сильно увеличивалась и оставалась завышенной на протяжении всего кормления. Снижение уровня происходило за первые 2 дня после отнятия детенышей от кормившей их до этого 10 дней матери. Все эти результаты доказывают, что изменения в проявлении p100 во многом зависят от развития и восстановления молочных желез.
p100 локализован субклеточно. Чтобы определить в каких клетках и в каких структурах этих клеток находится p100, были проведены субклеточное фракционирование и иммуногистохимический анализ. Они показали, что коактиватор присутствует и в ядре, и в мембранах, в том числе органелл. И эти результаты не зависели от смешения фракции при проведении анализов.
Иммуногистологический анализ показал, что белок не присутствует в соединительной ткани, а локализован в секреторных клетках эпителия. Имунную реакцию давали большинство клеток, хотя и не все. Иммуногистохимический метод показал, что ответ дает ядерный, а не мембранный белок. Однако серьезных исследований, объясняющих различия между данными результатами и результатами субклеточного фракционирования, не проводилось.
Распространенность p100 в клетках является ответом на лактогенетические сигналы, что было доказано путем проведения экспериментов с лактогенетическими гормонами на культурах клеток. Добавление пролактина вызвало увелечение количества p100.
Считалось, что рост концентрации белка может быть связан с увелечением транскрипции гена p100. К удивлению исследователей, количество p100 матричной РНК оставалось приблизительно на одном уровне и в период лактации в клетках, и в культуре в результате проведения реакции с пролактином. Это означает, что появление избытка p100 в данных условиях не было связано с транскрипцией его гена.
Discussion
Механизм, по которому происходит регуляция экспрессии генов в молочных белках, физиологическая роль коактиватора p100 и то, как достигается контроль транскрипции белка в период лактации, так и остались несяны. Возможно, в этих процессах играют роль какие-либо другие белки, которые до этого не рассматривались в данном контексте. Требуются дальнейшие исследования, чтобы прояснить эти и некоторые другие вопросы.
| Дата последнего изменения: 26/04/2013. |
|
© Trushina Nataliya |