Практикум 11

Гомология и выравнивание. Домены. JalView

1. Выбранное семейство доменов

Для анализа было выбрано семейство доменов GH172 second beta-sandwich domain.

Таблица 11.1
Параметр Значение
Name GH172 second beta-sandwich domain
AC PF11175
ID GH172_2nd
Seed 42
All 4k
SW 4k
Domain architectures 46
3D 6
Eukaryota 353
Archaea 14
Bacteria 3274

Этот домен был обнаружен в семействе ферментов Bifidobacterium dentium, Microbacterium arabinogalactanolyticum и родственных им белках. Занимательно, что эти белки содержат пару похожих доменов, которые образуют очень аппетитные структуры - бета-сэндвич в виде «желейного рулета» (jelly-roll beta-sandwich). Эти продукты кулинарного искусства собираются в тримерную структуру, которая может образовывать другие структуры более высокого порядка. Выходит своеобразный гранд-рулет.

Домен широко распространён среди бактерий, много меньше среди эукариот, а также встречается у архей.

2. Анализ seed-выравнивания

Seed-выравнивание было загружено в Jalview через меню:

File → Fetch sequences → PFAM (Seed)
Таблица 11.2
Параметр Значение
Выравнивание seed 42 последовательности, 293 позиции
Максимальный достоверный блок, включающие все последовательности (МДБ-All) 136-141
100% консервативные колонки в МДБ-all 137:T; 138:G; 139:T(32 из 42); 140:E
Максимальный достоверный блок, включающий не все последовательности (МДБ-notAll) Колонки от 4 до 12, последовательности 1-15; другие максимальные блоки с тем же подмножеством - 70-81; 108-121; 163-174; 196-222
100% консервативные колонки в МДБ-notAll 4:G; 5:[RYK]; 6:[FL]; 7:[HT]; 8:A; 9:[QTWIS](13 из 15); 10:[WHYS](14 из 15); 11:R(7 из 15); 12:R
Участок выравнивания, в котором нет никаких достоверных подблоков 20-28

Блок в позициях 20-28 содержит большое число, поэтому нет достаточных оснований считать, что выравнивание в этой области отражает реальный ход эволюции.

Файл проекта Jalview: blocks.jvp

3. Карта локального сходства (dotplot)

Для построения карты локального сходства были выбраны два белка с одинаковыми доменами GH172_1st, GH172_dom, GH172_2nd, но различной доменной архитектурой - в одном из белков дополнительно присутствовал домен DUF8441.

Таблица 11.3
Доменная архитектура 1 GH172_1st-GH172_dom-GH172_2nd
Белок с архитектурой 1 Q744K2
Доменная архитектура 2 GH172_1st-GH172_dom-GH172_2nd-DUF8441
Белок с архитектурой 2 D1W3J3
Dotplot
Рисунок 1. Dotplot

На протяжении всей диаграммы наблюдается выраженная центральная диагональ, характеризующая высокое сходство последовательностей. Диагональ прерывистая, что связано с наличиями вариабельных участков преимущественно между доменами, в которых происходили небольшие делеции и вставки. Дополнительный домен во втором белке, по-видимому, не вошёл в границы карты локального сходства, поэтому диагональ практически непрерывна.