Выравнивание последовательностей
Глобальное парное выравнивание гомологичных белков
Была проведена работа с белками штамма K12 кишечной палочки(_ECOLI) И штамма 168 сенной палочки(_BACSU).
Через Excel таблицы была определена мнемоника 3-ёх пар белков. Это ARAA, BRNQ и DCUP.
Через команду needle sw:----_ECOLI sw:----_BACSU ----.needle -auto было проведено выравнивание.
Protein Name | ID 1 | ID 2 | Score | % Identity | % Similarity | Gaps | Indels |
L-arabinose isomerase | ARAA_ECOLI | ARAA_BACSU | 1432.5 | 52.6% | 71.4% | 4 | 3 |
Branched-chain amino acid transport system carrier protein BrnQ | BRNQ_ECOLI | BRNQ_BACSU | 823.5 | 37.9% | 59.0% | 19 | 3 |
Uroporphyrinogen decarboxylase | DCUP_ECOLI | DCUP_BACSU | 629.5 | 38.9% | 56.2% | 23 | 6 |
Локальное парное выравнивание гомологичных белков
Protein Name | ID 1 | ID 2 | Score | % Identity | % Similarity | Gaps | Indels | Coverage 1 | Coverage 2 |
L-arabinose isomerase | ARAA_ECOLI | ARAA_BACSU | 1434.5 | 52.9% | 71.9% | 4 | 3 | 99% | 99% |
Branched-chain amino acid transport system carrier protein BrnQ | BRNQ_ECOLI | BRNQ_BACSU | 828.0 | 39.7% | 61.2% | 6 | 3 | 95% | 96.1% |
Uroporphyrinogen decarboxylase | DCUP_ECOLI | DCUP_BACSU | 632.5 | 39.8% | 57.7% | 15 | 6 | 98.3% | 96.6% |
Результат выравнивания у неродственных белков
Глобальное выравнивание
Protein Name 1 | Protein Name 2 | ID 1 | ID 2 | Score | % Identity | % Similarity | Gaps | Indels |
Antilisterial bacteriocin subtilosin biosynthesis protein AlbG | L-idonate 5-dehydrogenase (NAD(P)(+)) | ALBG_BACSU | IDND_ECOLI | 11.0 | 0.5% | 0.5% | 562 | 2 |
Локальное выравнивание
Protein Name | Protein Name 2 | ID 1 | ID 2 | Score | % Identity | % Similarity | Gaps | Indels | Coverage 1 | Coverage 2 |
Antilisterial bacteriocin subtilosin biosynthesis protein AlbG | L-idonate 5-dehydrogenase (NAD(P)(+)) | ALBG_BACSU | IDND_ECOLI | 24.5 | 15.8% | 42.1% | 14 | 1 | 16.3% | 7% |
Выравнивание неродственных белков Antilisterial bacteriocin subtilosin biosynthesis protein AlbG и L-idonate 5-dehydrogenase (NAD(P)(+)) показало, что они не гомологичны. К примеру, идентичность 15.8%, то есть низкая.
Множественное выравнивание белков и импорт в Jalview
Через поиск в UniProt всех белков из Swiss-Prot с мнемоникой ARAA было получено 116 белков.
Семь белков, выбранных для выравнивания: ARAA_ECOLI, ARAA_BACSU, ARAA_BACHD, ARAA_THEMA, ARAA_LACBA, ARAA_TOLAT, ARAA_GEOTN.
Через поиск из Swiss-Prot были получены все белки мнемоники ARAA, далее с помощью Excel таблицы выделены семь конкретных белков. Этот список был импортирован в Jalview, было выполнено выравнивание.
Файл с выравниванием Jalview.
Структуры белков похожи. У ARAA_THEMA нуклеотиды выпадают на промежутке от 242 до 245 и выпадает 361 нуклеотид. У белка ARAA_LACBA нуклеотиды выпадают на промежутке от 478 до 500.
Структуры консервативны на участках: 81-85; 127-129; 180-183; 287-292; 331-336.
Менее консервативные участки: 45-85; 205-240; 405-421; 451-460.