Blast

Поиск гомологов белка в Swiss-Prot

Для выполнения задания я взял белок из практикума #7 - A0A3Q8WHX8.

Параметры поиска гомологов:

blast1
Таблица. 1. Параметры поиска гомологов белка Ribonuclease E.

По запросу было найдено 17 гомологов. Случайным образом я отобрал 6 белков (включая исходный) для множественного выравнивания. Выравнивание производилось в программе Jalview методом T-coffee. Исходя из результатов выравнивая, я сделал вывод, что белки гомологичны. Наиболее консервативные участки находятся на интервале 0-455.

Файл выравнивания в формате Jalview

Организмы, которые участвовали в выравнивании: Escherichia coli K-12, Haemophilus influenzae Rd KW20, Buchnera aphidicola str. Sg (Schizaphis graminum), Buchnera aphidicola str. APS (Acyrthosiphon pisum), Halomonas venusta, Buchnera aphidicola str. Bp (Baizongia pistaciae).

Поиск гомологов зрелого вирусного белка, вырезанного из полипротеина

Из базы данных Swiss-Prot я взял вирусный полипротеин Polyprotein pp62 (PP62_ASFB7), принадлежин он организму African swine fever virus (strain Badajoz 1971 Vero-adapted).

virustab
Таблица. 2. Основные характеристики полипротеина.

С помощью команды была получена цепь p15 полипротеина: seqret sw:PP62_ASFB7[2:158] segment.fasta

Fasta файл цепи полипротеина

Все параметры поиска Blast, за исключением фильтра low complexity regions, остались неизменными. Результатом выполнения запроса было 4 находки гомологов.

В результате выравнивания этих последовательностей была установлена гомологичность.

Выравнивание полипротеина virus.jvp

Исследование зависимости E-value от объёма банка

Число находок не изменилос, но E-Value для каждой изменился.
В первом поисковом запросе (без фильтров) для последовательности P0CA08.1 E-value равен 3e-111, во втором поиске (фильтр по вирусам) E-value равен 1e-112.
После произведения вычислений: E-value2/E-value1 * 100, доля вирусных белков составила 3.3%.