Практикум 10

Практикум 10

В практикуме 7 я выбрала белок PYRG_PHEZH (CTP - синтаза) бактерии Phenylobacterium zucineum (strain HLK1).

Параметры, которые были установлены:

Database: UniProtKB/Swiss-Prot(swissprot)

Organism: exclude: Phenylobacterium zucineum HLK1 (taxid:450851).

Max target sequences: 1000, так как при меньшем количестве E-value везде 0.0

Word size: изменение длины слова не влияло на выдачу (583 результата), поэтому я взяла 5

Остальные параметры были оставлены без изменения.

Выдача BLAST

Так как на протяжении всей длины последовательности есть консервативные участки, можно сделать вывод, что белки гомологичны.

Множественное выравнивание

Гомологи зрелого вирусного белка

ID вируса: GP_SEOU8

AC вируса: P33455

Название: Seoul virus (strain 80-39)

Была выбрана цепь Glycoprotein N с кооринатами 18..646

Файл с последовательностью зрелого белка

Текстовая выдача BLAST

BLAST выдал 18 находок, при изменении Word size их количество не менялось. Для выравнивания было выбрано шесть, помимо исходного: P33455.1, P17880.1, P28729.1, P16853.1, Q806Y7.1, P08668.1, P41265.1

Файл с множественным выравниванием

По выравниванию видно, что у белков большой процент идентичности, поэтому можно с уверенностью сказать, что они являются гомологами.

Сильнее всего отличается полипротеин GP_PUUMK (AC:P41265). Он длиннее остальных (1148) и у него чаще встречаются замены.

Исследование зависимости E-value от объёма банка

Для предыдущего белка все 18 находок имели E-value 0.0, поэтому было принято решение выбрать другой белок: POLN_ABPVR. При первой выдаче BLAST было получено 115 гомологов, а при дополнительном поиске по таксону Viruses - 119.

Учитывая, что длина и вес (S) исходной последовательности не менялась, можно оценить размеры баз данных, найдя их соотношение. В числителе находится размер базы данных Вирусов в Swiss-Prot, а в знаменателе размер всей базы данных Swiss-Prot. При этом, это оотношение будет равно отношению E-value в соответствующих запросах. Так, приблизительная оценка равна 0.05