учебная страница панькиной вари

11. Pfam-практикум

1. Характеристики домена

Таблица 1. Краткая характеристика семейства доменов Fibronectin type I domain
Ключ Информация Комментарии
AC pfam Имеет вид PF00039
ID pfam fn1
SEED число последовательностей в выравнивании SEED: 54
All Число всех белков с доменом семейства: 22291
SW Белков с доменом SwissProt: 27
architectures Число разных доменных архитектур: 268 Часто представлен в начале и конце белка по 3-5 копий (домен является повтором), вместе с несколькими доменами (тоже повторами) fn2 и 7-10 доменами fn3 -- в классическом фибронектине, а также он представлен в других факторах свертывания крови
3D В базе представлено 26 структур представлен двумя антипараллельными бета-листами, причем первый двуцепочечный соединен со вторым трехцепочечным через дисульфидные связи (4 консервативных остатка цистеина).
Taxonomy У Прокариот не обнаружен. Eukariota, Chordata, преимущественно Craniata (4k), Vertabrata, Teleostei Преимущественно представлен у Позвоночных Vertebrata

По функции можно отдельно отметить, что домен учавствует в связывании с фибрином (см architectures).

2. Выравнивание доменов в seed с точки зрения гомологии

Таблица 2. Таблица-характеристика выравниваний
Характеристика Информация Комментарии
Записей в выравнивании seed 54 Дальнейшее расширение колонок невозможно, тк в конечной колонке либо не все аминокислоты хотябы функционально гомологичны, либо начинаются гэпы
Максимальный достоверный блок, включающий ВСЕ последовательности (МДБ-all) 30:32Консервативный блок, ограниченный двумя консервативными цистеинами
100% консервативные колонки в МДБ-all 30:C, 32:С
Максимальный достоверный блок, включающий НЕ ВСЕ последовательности. (МДБ-notAll) Колонки: от 1 до 18. Последовательности: от 1й до 6й.
100% консервативные колонки в МДБ-notAll Абсолютно консервативные: 1:C, 2:F, 3:E, 4:P, 5:Q, 9:F, 10:F, 11:H, 14:E, 16:W. Функционально консервативные: 6:[L, F], 7:[L, F], 18:[R, K]. Колонки 8, 12 13, 15 не консервативные
Участок выравнивания, в котором нет никаких достоверных подблоков, и потому маловероятно, что выравнивание на этом участке отражает ход эволюции. Колонки от 8 до 17.

Ссылка на проект в Jalview

3. Dot-plot разных доменных архитектур

Таблица 3. Характеристики доменных архитектур выравнивания
доменная архитектура 1 PF00039 - PF00008 - PF00051 - PF00089
Белок с архитектурой 1 P15638 Salivary plasminogen activator alpha 2
доменная архитектура 2 PF00039 - PF00051 - PF00051 - PF00089
Белок с архитектурой 2 B4DNJ1 t-plasminogen activator
Dot-plot двух доменных архитектур: по белкам P15638 B4DNJ1

На графике иллюстрируются даннные, представленные в таблице. Действительно, у этих белков домены идут в одном порядке и практически полностью повторяют друг-друга, за исключением EGF-like домена (PF00008), представленного только в P15638. А также в области 210 ак этого белка есть индель, не выравнивающийся с B4DNJ1. В остальных местах белки хорошо выравниваются между собой.