include ("../../inc/apss.inc"); ?>
Работа с филогенетическим деревом нескольких бактерийОтобранные бактерии
Название Мнемоника Agrobacterium tumifaciens AGRRK Rhodobacter sphaeroides RHOS4 Ralstonia pickettii RALPJ Neisseria meningitidis NEIMA Escherichia coli ECOLI Yersinia pestis YERPE Yersinia pseudotuberculosis YERPS Proteus mirabilis PROMH
(AGRRK, (RHOS4, (RALPJ, (NEIMA, (PROMH, (ECOLI, (YERPE,YERPS)))))));
5 нетривиальных ветвей
(AGRRK, RHOS4) против (RALPJ, NEIMA, ECOLI, PROMH, YERPE, YERPS) (RALPJ, NEIMA) против (AGRRK, RHOS4, ECOLI, PROMH, YERPE, YERPS) (NEIMA, RALPJ, AGRRK, RHOS4) против (ECOLI, PROMH, YERPE, YERPS) (PROMH, NEIMA, RALPJ, AGRRK, RHOS4) против (ECOLI, YERPE, YERPS) (PROMH, ECOLI, NEIMA, RALPJ, AGRRK, RHOS4) против (YERPE, YERPS)
Название | Мнемоника | Таксономия |
Agrobacterium tumifaciens | AGRRK | Bacteria; Proteobacteria; Alphaproteobacteria; Rhizobiales; Rhizobiaceae; Rhizobium/Agrobacterium group; Agrobacterium |
Rhodobacter sphaeroides | RHOS4 | Bacteria; Proteobacteria; Alphaproteobacteria; Rhodobacterales; Rhodobacteraceae; Rhodobacter |
Ralstonia pickettii | RALPJ | Bacteria; Proteobacteria; Betaproteobacteria; Burkholderiales; Burkholderiaceae; Ralstonia |
Neisseria meningitidis | NEIMA | Bacteria; Proteobacteria; Betaproteobacteria; Neisseriales; Neisseriaceae; Neisseria |
Escherichia coli | ECOLI | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae; Escherichia |
Yersinia pestis | YERPE | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae; Yersinia |
Yersinia pseudotuberculosis | YERPS | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae; Yersinia |
Proteus mirabilis | PROMH | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae; Proteus |
1 | Bacteria; Proteobacteria; Alphaproteobacteria |
2 | Bacteria; Proteobacteria; Betaproteobacteria |
3 | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae |
4 | Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Enterobacteriales; Enterobacteriaceae; Yersinia |
Для реконструкции филогенетического дерева был взят белок энолаза, мнемоника: ENO (фермент, участвующий в предпоследнем этапе гликолиза. Энолаза катализирует переход 2-фосфо-D-глицериновой кислоты в фосфоенолпируват. При этом от 2-фосфо-D-глицерата отщепляется одна молекула воды).
Последовательности белков энолазы отобранных мной бактерий из банка Swiss-Prot: prot.fasta
Далее, я получил множественное выравнивание программой muscle (mscl_prot.fasta), чтобы провести реконструкцию дерева при помощи программы fprotpars. Результаты ее работы приведены ниже.
Скобочная формула:
((((RHOS4,AGRRK),(NEIMA,RALPJ)),((YERPS,YERPE),ECOLI)),PROMH);
Схематическое изображение:
+--RHOS4 +-----7 ! +--AGRRK +--------6 ! ! +--NEIMA ! +-----5 +--4 +--RALPJ ! ! ! ! +--YERPS ! ! +--3 1 +-----------2 +--YERPE ! ! ! +-----ECOLI ! +--------------------PROMH
Топология дерева совпадает с правильной.
При помощи программы frpotdist оценивалось эволюционное расстояние между последовательностями. На выходе программа выдала файл: |*|
PROMH ECOLI YERPE YERPS RALPJ NEIMA AGRRK RHOS4 PROMH 0.000000 0.097775 0.108578 0.106114 0.457518 0.537510 0.562791 0.552563 ECOLI 0.097775 0.000000 0.056078 0.058451 0.434511 0.499523 0.545665 0.500399 YERPE 0.108578 0.056078 0.000000 0.002261 0.429656 0.497497 0.535921 0.520834 YERPS 0.106114 0.058451 0.002261 0.000000 0.426479 0.494206 0.532541 0.524325 RALPJ 0.457518 0.434511 0.429656 0.426479 0.000000 0.318335 0.433120 0.444920 NEIMA 0.537510 0.499523 0.497497 0.494206 0.318335 0.000000 0.483030 0.423113 AGRRK 0.562791 0.545665 0.535921 0.532541 0.433120 0.483030 0.000000 0.333097 RHOS4 0.552563 0.500399 0.520834 0.524325 0.444920 0.423113 0.333097 0.000000
Оценка отклонений расстояний от ультраметричности:
Рассмотрим RHOS4, NEIMA, YERPE.
1. d(RHOS4, NEIMA)=0.423113
2. d(NEIMA, YERPE)=0.497497
3. d(YERPE, RHOS4)=0.520834
Отклонение от ультраметричности равно примерно 4.48 %.
Рассмотрим ECOLI, YERPE, YERPS.
1. d(ECOLI, YERPE)=0.056078
2. d(YERPE, YERPS)=0.002261
3. d(YERPS, ECOLI)=0.058451
Отклонение от ультраметричности равно примерно 4.06 %.
Оценка отклонений расстояний от аддитивности:
Рассмотрим RHOS4, NEIMA, YERPE и YERPS.
1. d(RHOS4, NEIMA) + d(YERPE, YERPS)=0.423113 + 0.002261 = 0.425374
2. d(RHOS4, YERPE) + d(NEIMA, YERPS)=0.520834 + 0.494206 = 1.01504
3. d(RHOS4, YERPS) + d(NEIMA, YERPE)=0.524325 + 0.497497 = 1.021822
Наиболее близкие по зн. 2,3, также они больше 1, следовательно эта тройка почти удв. утв. аддитивности -
если есть 4 последовательности: A, B, C, D, - то из трех сумм
d(A,B) + d(C,D); d(A,C) + d(B,D); d(A,D) + d(B,C) две равны между собой и больше третьей.
Было полученно две реконструкции дерева программой fneighbor, используя два алгоритма: UPGMA и Neighbor-Joining.
UPGMA
+--PROMH +-----------3 ! ! +-ECOLI ! +-2 ! ! +YERPE ! +-1 --7 +YERPS ! ! +--------RALPJ ! +---4 ! ! +--------NEIMA +-6 ! +---------AGRRK +--5 +---------RHOS4
+-ECOLI +-5 ! ! +YERPE ! +-4 ! +YERPS ! ! +-------RALPJ ! +-2 ! ! +-----------NEIMA 6-------------3 ! ! +----------AGRRK ! +----1 ! +---------RHOS4 ! +---PROMH
Алгоритм UPGMA выдаёт укоренённое дерево с длинами ветвей, а Neighbor-Joining - неукоренённое. Деревья, полученные при помощи разных алгоритмов не отличаются топологически, за исключением того, что первое дерево имеет снова одну лишнюю ветвь почти, как и в результатах программы fprotpar, также топология всех деревьев в общем то совпадает с правильным деревом.